Соевый бульон tripticaseína основа, подготовка и использование

соевый бульон Это жидкая культуральная среда, очень питательная и неселективная. Благодаря своей универсальности, он является одним из наиболее широко используемых жидких питательных сред в лаборатории микробиологии..

Он также известен как бульон триптиказный соевый или казеиновый соевый, аббревиатура которого TSB для его аббревиатуры на английском языке. Я триптик Бульон или CST для его сокращения на испанском языке. Его использование очень разнообразно из-за его состава. Он состоит из триптина, соевого пептона, хлорида натрия, дикалийфосфата и глюкозы..

Он способен воспроизводить клинически важные патогенные бактерии, в том числе те, которые являются требовательными к питанию, и анаэробные бактерии. Некоторые условно-патогенные грибки и загрязнители могут также развиваться в этой среде.

Благодаря высокой питательной способности он обладает высокой чувствительностью для обнаружения микробного загрязнения, поэтому он был выбран Службой инспекции здоровья животных и растений Министерства сельского хозяйства США для микробиологического анализа вакцин..

Аналогичным образом, соевый суп из триптиказа отвечает требованиям различных фармакопей (Европейская РП, Японская JP и USP для Северной Америки) для микробиологического исследования продуктов на промышленном уровне, таких как косметика и продукты питания..

С другой стороны, стоит отметить, что, несмотря на большую полезность, эта среда относительно недорогая, поэтому она доступна для большинства микробиологических лабораторий. Это также очень легко приготовить.

индекс

• 1 фундамент
• 2 Подготовка
  • 2.1 Триптикамин соевый
  • 2.2-Варианты триптиказеинового соевого бульона
• 3 Использование
• 4 отобранных
• 5 Контроль качества
• 6 Ограничения
• 7 ссылок

фундамент

Триптеина, пептон и глюкоза обеспечивают его необходимыми питательными свойствами, превращая его в идеальную среду для быстрого развития микробов..

Приблизительно от 6 до 8 часов инкубации уже можно увидеть рост большинства микроорганизмов. Тем не менее, существуют медленно растущие штаммы, которые могут расти в течение нескольких дней.

Хлорид натрия и дикалийфосфат действуют как осмотическое равновесие и регулятор рН соответственно. О наличии роста свидетельствует появление помутнения в среде; если рост отсутствует, среда остается прозрачной.

Из-за его светлого цвета можно наблюдать образование пигментов, таких как показано на изображении, расположенном в начале изделия, что соответствует пигменту, полученному путем Pseudomonas aeruginosa. 

подготовка

-Триптический соевый бульон

Чтобы приготовить триптиказный соевый бульон, взвесьте 30 граммов обезвоженной коммерческой среды в цифровом масштабе. Затем он растворяется в литре дистиллированной воды, содержащейся в фиоле.

Смеси дают отстояться в течение 5 минут, а затем подают к источнику тепла, чтобы способствовать растворению среды. При кипячении в течение 1 минуты следует часто встряхивать.

После растворения его распределяют в пробирки соответствующего размера по мере необходимости. Можно использовать трубки с хлопковой пробкой или бакелитовой пробкой. Затем пробирки стерилизуют средой в автоклаве при 121 ° С в течение 15 минут..

РН среды должен составлять 7,3 ± 0,2

Следует принимать во внимание, что цвет дегидратированной культуральной среды является светло-бежевым и должен храниться при температуре от 10 до 35 ° C в сухом месте. В то время как приготовленный бульон светло-янтарный и его следует хранить в холодильнике (от 2 до 8 ° C).

-Вариации триптиказеинового соевого бульона

Модифицированный триптикамином соевый бульон может быть приготовлен путем добавления солей желчных кислот и новобиоцина, чтобы сделать его селективным для выделения Кишечная палочка. Другим вариантом для этой же цели является приготовление триптиказного соевого бульона с добавлением ванкомицина, цефиксима и теллурита (2,5 мкг / мл)..

С другой стороны, в соевый бульон триптиказеина можно добавить больше глюкозы (0,25%), если целью является стимулирование образования биопленки..

использование

Это достаточно питательно, чтобы позволить рост требовательных или раздражающих бактерий, таких как Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp. И Brucella sp., нет необходимости дополнять кровью или сывороткой.

Кроме того, некоторые грибки могут развиваться в этом бульоне, такие как Комплекс Candida Albicans, Aspergillus sp и Histoplasma capsulatum.

Кроме того, эта среда в анаэробных условиях идеальна для восстановления бактерий, принадлежащих к роду Clostridium, а также для анаэробных неспорулированных бактерий, имеющих клиническое значение..

При добавлении 6,5% хлорида натрия можно использовать для роста энтерококк и другие стрептококки группы D.

На исследовательском уровне это было очень полезно в различных протоколах, особенно при изучении бактерий, которые образуют биопленки или биопленки. Он также используется для приготовления бактериальной суспензии в 0,5% раствора Mac Farland, необходимого для выполнения антибиограммы по методу Кирби и Бауэра..

В этом случае от 3 до 5 колоний аналогичного вида отбирают и эмульгируют в 4-5 мл триптиказеинового соевого бульона. Затем его инкубируют в течение 2-6 часов при 35-37 ° С и затем доводят до желаемой концентрации, используя стерильный физиологический раствор. Триптиказу соевые бульоны не следует использовать в течение 18-24 часов инкубации.

посаженный

Образец может быть посеян непосредственно или субкультивированными чистыми колониями, взятыми из селективных сред. Инокулят должен быть небольшим, чтобы не затуманивать среду перед инкубацией..

Обычно инкубируется при 37 ° C в аэробиозе в течение 24 часов, но эти условия могут варьироваться в зависимости от микроорганизма, который ищут. При необходимости его также можно инкубировать в анаэробных условиях при 37 ° С в течение нескольких дней. Например, в требовательных или медленно растущих микроорганизмах можно инкубировать до 7 дней.

При микробиологическом анализе фармацевтических субстанций, таких как вакцины, протоколы более строгие. В этих случаях бульон без роста не выбрасывают до тех пор, пока он не достигнет 14 дней непрерывной инкубации..

Контроль качества

Для каждой подготовленной партии 1 или 2 пробирки следует инкубировать без инокуляции, чтобы продемонстрировать стерильность. Должно остаться без изменений.

Вы также можете посадить известные штаммы, чтобы оценить их поведение. Среди штаммов, которые могут быть использованы:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida Albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Золотистый стафилококк ATCC 6538 или 25923, Кишечная палочка ATCC 8739,  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.

Во всех случаях рост должен быть удовлетворительным в условиях атмосферы и температуры, подходящих для каждого микроорганизма..

ограничения

-Ферментация глюкозы вызывает снижение рН среды при производстве кислот. Это может быть неблагоприятно для выживания некоторых микроорганизмов, чувствительных к кислотности.

-Не рекомендуется для поддержания штаммов, потому что в дополнение к кислотности бактерии через несколько дней истощают питательные вещества с последующим накоплением токсичных веществ, которые делают окружающую среду негостеприимной.

-Необходимо соблюдать осторожность при соблюдении всех протоколов стерильности, так как бульоны легко загрязняются.

-После приготовления триптиказеиновых соевых бульонов не пытайтесь перенести бульон в другую стерильную пробирку, потому что этот тип маневров очень чувствителен к загрязнению.

ссылки

1. Кона Е. Условия для хорошего исследования восприимчивости с помощью агар-диффузионного теста. Преподобный чил. infectol. 2002; 19 (2): 77-81. Доступно по адресу: scielo.org
2. Британская лаборатория Тритеиновый соевый бульон. 2015. Доступно по адресу: britanialab.com
3. Лаборатория MCD. Trytica соевый бульон. Доступно по адресу: electronic-systems.com
4. Неоген лаборатория. Соевый бульон Триптих. Доступно по адресу: foodsafety.neogen.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологическая диагностика Бэйли и Скотта. 12 изд. Редакция Panamericana S.A. Аргентина.
6. Рохас Т., Васкес Й., Рейес Д., Мартинес С., Медина Л. Оценка методики магнитной иммуносепарации для восстановления Кишечная палочка O157: H7 в молочных кремах. АЛАН. 2006; 56 (3): 257-264. Доступно по адресу: scielo.org.ve
7. Гил М., Мерчан К., Кеведо Г., Санчес А., Никита Г., Рохас Т., Санчес Д., Финол М. Формирование биопленки в изолированных Золотистый стафилококк в соответствии с антимикробной восприимчивостью и клиническим происхождением. Vitae. 2015; 62 (1): 1-8. Доступно по адресу: saber.ucv.ve
8. Нарваес-Браво C, Карруйо-Нуньес G, Морено М, Родас-Гонсалес А, Хоет А, Виттум Т. Выделение Кишечная палочка O157: H7 в образцах стула крупного рогатого скота двойного назначения из муниципалитета Миранда, штат Сулия, Венесуэла. Преподобный (Маракайбо), 2007; 17 (3): 239-245. Доступно по адресу: scielo.org