Фогель-Джонсон Агар Фонд, подготовка и использование



Фогель-Джонсон Агар представляет собой твердую, селективную и дифференцированную культуральную среду, специально разработанную для выделения Золотистый стафилококк. Эта среда была создана Фогелем и Джонсоном в 1960 году на основе модификации глицинового теллуритового агара, созданной в 1955 году Зебовицем, Эвансом и Нивеном..

Модификация заключалась в увеличении концентрации маннита, присутствующего в среде, и включении индикатора pH. Действующая формула состоит из триптина, дрожжевого экстракта, маннита, дикалийфосфата, хлорида лития, глицина, фенолового красного, агара, 1% раствора теллурита калия и воды.

Следует отметить, что существуют и другие средства, такие как агар Фогеля-Джонсона, селективные для выделения S. aureus, такие как соленый маннитовый агар и агар Байрд Паркер. В этом смысле можно сказать, что основа агара Фогеля-Джонсона представляет собой смесь соленого агара с маннитом и агара Байрда Паркера..

В первой колонии S. aureus Их отличает ферментация маннита и превращение индикатора pH в желтый. С другой стороны, во втором S. aureus он характеризуется восстановлением теллурита до теллура и образованием серых или черных колоний. Оба свойства наблюдаются в агаре Фогеля-Джонсона.

Этот носитель, как и его аналоги, полезен для обнаружения Золотистый стафилококк в образцах пищевых продуктов, санитарном контроле промышленных продуктов и в клинических образцах.

индекс

  • 1 фундамент
    • 1.1 Вклад питательных веществ
    • 1.2 Избирательная сила
    • 1.3 Дифференциальная мощность
    • 1.4 Осмотический баланс и отвердитель
  • 2 Подготовка
    • 2,1% вес / объем раствора теллурита калия
    • 2.2 Фольга-Джонсона агаровая базовая среда
  • 3 Использование
  • 4 Контроль качества
  • 5 ссылок

фундамент

Вклад питательных веществ

Среда Фогеля-Джонсона содержит триптейн и дрожжевой экстракт; оба вещества обеспечивают аминокислоты с длинной цепью, которые служат источниками углерода и азота, необходимыми для роста бактерий. Бактерии, способные расти в этой среде, будут получать питательные вещества из этих веществ..

Выборочная сила

Агар Фогеля-Джонсона способен ингибировать рост грамотрицательных бактерий и даже некоторых грамположительных бактерий, способствуя развитию коагулазо-положительных стафилококков. Ингибирующими веществами являются теллурит калия, хлорид лития и глицин..

Дифференциальная мощность

Вещества, которые составляют эту дифференциальную среду, - это маннит и теллурит калия. Маннит является углеводом, и когда он ферментируется, образуются кислоты, которые превращают среду из красного в желтый, что происходит благодаря наличию индикатора рН фенолового красного.

В то время как бесцветный теллурит при восстановлении до свободного металлического теллурида приобретает темно-серый или черный цвет.

Золотистый стафилококк сбраживает маннит и восстанавливает теллурит до теллура. Вот почему типичные колонии S. aureus в этой среде они серые или черные, окруженные желтой средой.

Бактерии, которые растут в этой среде и не восстанавливают теллурит или ферментируют маннит, будут образовывать прозрачные колонии, окруженные красной средой, даже более интенсивной, чем первоначальный цвет, из-за подщелачивания среды с использованием пептонов..

С другой стороны, бактерии, которые уменьшают количество теллурита, но не ферментируют маннит, будут расти как серые или черные колонии, окруженные темно-красным цветом..

Если среда была приготовлена ​​без добавления теллурита калия, колонии S. aureus они будут развиваться как желтые колонии, окруженные желтой средой, такой как соленый маннитовый агар.

Осмотический баланс и отвердитель

Дипокалийфосфат поддерживает осмотический баланс среды и регулирует рН до нейтральности. 7.2. В то время как агар дает твердую консистенцию для культуральной среды.

подготовка

1% раствор теллурита калия в / о

Этот раствор не входит в обезвоженную среду, потому что его нельзя стерилизовать в автоклаве. По этой причине его готовят отдельно и добавляют в стерилизованную среду..

Некоторые коммерческие дома продают готовый к употреблению 1% раствор теллурита калия. Если вы хотите подготовиться в лаборатории, выполните следующие действия:

Взвесить 1,0 г теллурита калия и отмерить 100 мл дистиллированной воды. Растворите теллурит калия в части воды и затем доведите количество воды до 100 мл. Стерилизовать раствор методом фильтрации.

Агаровая среда Фогеля-Джонсона

Взвесьте 60 г обезвоженной среды и растворите в 1 л дистиллированной воды. Смесь нагревают до кипения, чтобы способствовать полному растворению. Во время процесса растворения среда часто перемешивается.

Стерилизовать в автоклаве при 15 фунтах давления и 121 ° С в течение 15 минут. Извлеките из автоклава и дайте постоять, пока среда не достигнет температуры приблизительно от 45 до 50 ° C. Добавить 20 мл предварительно приготовленного раствора теллурита калия до 1%..

Смешайте и разлейте в стерильные чашки Петри. Разрешить отвердеть и заказать перевернутые в плашках для последующего хранения в холодильнике до использования.

Конечный pH приготовленной среды должен составлять 7,2 ± 0,2..

Перед посадкой образца подождите, пока пластина не изменит температуру окружающей среды..

Цвет приготовленной среды - красный.

использование

Хотя это может быть использовано для изоляции S. aureus в любом типе образцов, он в основном используется для микробиологического анализа фармацевтических продуктов, косметики и продуктов питания.

Рекомендуется, чтобы инокулят был плотным. Посев может быть проведен путем стратификации с помощью платиновой ручки или по поверхности шпателем Дригальски..

Планшеты инкубируют при 35-37 ° С в течение 24-48 часов при аэробиозе..

Контроль качества

Для контроля качества среды Фогеля-Джонсона можно использовать следующие контрольные штаммы:

Золотистый стафилококк ATCC 25923, Золотистый стафилококк ATCC 6538, Стафилококк эпидермидис ATCC 12228, Кишечная палочка ATCC 25922 или Proteus mirabilis ATCC 43071.

Ожидаемый результат заключается в следующем: для штаммов S. aureus Удовлетворительный рост с черными колониями, окруженными желтой средой. в S. epidermidis регулярный рост с полупрозрачными или черными колониями, окруженными красной средой.

Аналогично для Кишечная палочка ожидается, что будет полное торможение, и для Proteus mirabilis частичное или полное торможение; если он растет, он будет делать это экономно, и колонии будут черными в окружении среднего красного цвета.

ссылки

  1. BD Laboratories. VJ (Фогель и Джонсон Агар). 2006. Доступно по адресу: bd.com
  2. Лаборатории Британии. Фогель-Джонсон Агар. 2015. Доступно по адресу: britanialab.com
  3. Лаборатории Британии. Калий теллурит. 2015. Доступно по адресу: britania.com
  4. Лаборатория Химедия. Фогель-Джонсон Агар Медиум. 2018. Доступно по адресу: himedialabs.com/TD/MU023.pdf
  5. Фогель-Джонсон Агар База. Мерк Микробиология Руководство. 12-е издание, стр. 502-503. Доступно в: Пользователи / Команда / Загрузки
  6. Авторы Wikipédia, "Ágar Vogel Jonhson", Википедия к энциклопедической ливре,   disponível em: wikipedia.org.
  7. Венесуэльский Стандарт Ковенен 1292-89. (1989). Продукты питания. Изоляция и подсчет Золотистый стафилококк. Доступно в:sencamer.gob.ve