Поделиться:
Соевый агар tripticaseína основы, подготовка и использование
триптиказеин соевый агар или триптиказо-соевый агар является твердой, неселективной и питательной питательной средой. Это обозначено буквами TSA для его аббревиатуры на английском триптиказо соевый агар. Он состоит из триптина, соевого пептона, хлорида натрия и агар-агара..
Благодаря высокой питательной способности он идеально подходит для выращивания умеренно требовательных и нетребовательных микроорганизмов. Среда без дополнительных добавок не рекомендуется для первичных культур, но она очень полезна для субкультивирования чистых штаммов и поддержания их жизнеспособности, среди прочего.
Кроме того, этот агар служит основой для приготовления обогащенных сред, таких как кровяной агар, особенно когда необходимо наблюдать закономерности гемолиза и устанавливать таксоны оптохина и бацитрацина, необходимые для диагностики Streptococcus pneumoniae и Streptococcus pyogenes соответственно.
С другой стороны, в сочетании с антибиотиками полезно выделять факультативные и строгие анаэробные микроорганизмы, имеющие клиническое значение, из образцов со смешанной флорой..
Наконец, состав триптиказеинового соевого агара и его характеристики соответствуют требованиям, установленным различными фармакопеями (европейскими, японскими и североамериканскими)..
индекс
- 1 фундамент
- 2 Подготовка
- 2.1 Триптиказеиновые соевые агаровые пластины
- 2.2 Триптиказеиновые соевые агаровые чашки с добавлением крови
- 2.3 Триптиказеиновые соевые агаровые чашки с добавлением нагретой крови
- 2.4 Клинья триптиказеинового соевого агара
- 3 использования
- 4 отобранных
- 5 Контроль качества
- 5.1 Контроль стерильности
- 5.2 Контроль роста
- 5.3 Контроль роста и характера гемолиза триптиказеинового соевого агара с добавлением крови
- 6 Ссылки
фундамент
Для правильного развития бактерий необходимо наличие энергетических вкладов, таких как аминокислоты, витамины, пуриновые и пиримидные основания..
В этом смысле триптейн и соевый пептон обеспечивают эти питательные вещества микроорганизмам, тем самым обеспечивая их полное развитие. Однако для требовательных бактерий необходимо дополнить этот агар дефибринированной или нагретой кровью, чтобы увеличить его обогащение..
С другой стороны, если антибиотики добавляются в среду, она становится селективной средой. Вы также можете добавить 0,6% дрожжевого экстракта, чтобы выделить виды рода Listeria, добавив при этом цистиновый теллурит и Кровь ягненка идеально подходит для Corynebacterium diphteriae.
Наконец, хлорид натрия дает осмотический баланс среде, а агар обеспечивает твердую консистенцию.
подготовка
Триптиказеин соевые агаровые пластины
Для приготовления соевого агара с триптиказеином в цифровой шкале следует взвесить 40 граммов дегидратированной коммерческой среды. Растворяется в литре дистиллированной воды, содержащейся в фиоле.
Смеси дают отстояться в течение 5 минут, а затем подают к источнику тепла, чтобы способствовать растворению среды. Его следует часто перемешивать и оставить кипеть на 1 или 2 минуты. Затем среду стерилизуют в автоклаве при 121 ° С в течение 15 минут..
Дать остыть до 50 ° С и разложить в стерильные чашки Петри. Пусть затвердеть, перевернуть, заказать в табличках и хранить в холодильнике.
Конечный pH среды должен составлять 7,3 ± 0,2..
Следует принимать во внимание, что цвет дегидратированной культуральной среды является светло-бежевым и должен храниться при температуре от 10 до 35 ° C в сухом месте..
Со своей стороны приготовленный агар - светло-янтарный. Подготовленные тарелки следует хранить в холодильнике (от 2 до 8 ° C) до использования.
Пластины должны достичь комнатной температуры перед использованием.
Триптиказеиновые соевые агаровые чашки с добавлением крови
Кровяной агар готовят путем добавления 5% дефибринированной крови во время охлаждения триптиказеинового соевого агара при 50 ° С. Смесь гомогенизируют, вращая легкими движениями.
Подавать в стерильных чашках Петри. Цвет среды должен быть вишнево-красным.
Триптиказеиновые соевые чашки с добавлением нагретой крови
Чтобы приготовить кровяной агар на основе TSA, процедуры, описанные выше, являются такими же, но при выходе из автоклава его оставляют стоять до тех пор, пока температура среды не станет приблизительно между 56 и 70 ° C. В это время кровь помещается и перемешивается, пока среда не станет коричневой.
Подавать в стерильных чашках Петри. Цвет среды - шоколадно-коричневый.
Клинья триптиказеинового соевого агара
Процедура приготовления агара такая же, как описанная для чашек, с той разницей, что вместо подачи среды на чашки Петри его распределяют между 10 и 12 мл в пробирках с бакелитовой крышкой перед стерилизацией..
Затем пробирки автоклавируют при 121 ° С в течение 15 минут. Уходя, они опираются с помощью опоры и позволяют себе укрепиться.
Подготовленные клинья высевают на поверхность и служат для поддержания определенных нетребовательных жизнеспособных микроорганизмов в течение определенного времени..
приложений
Триптиказеиновый соевый агар используется в следующих случаях:
-В качестве основы для приготовления классического кровяного агара, который обычно используется в большинстве лабораторий.
-Выделение требовательных бактерий.
-Наблюдение за картиной гемолиза.
-Выполнение диагностических тестов.
-В качестве основы для приготовления специального кровяного агара для Corynebacterium diphteriae, с теллур цистином и кровь ягненка.
-В качестве основы для приготовления агара крови ягненка, больше канамицин-ванкомицин для роста анаэробов, особенно Bacteroides sp.
-Для поддержания нетребовательных штаммов (Bacterioteca).
-Микробный аэробный счет в исследовании микробного предела образцов воды, окружающей среды, продуктов питания и косметики.
посаженный
Образцы можно высевать непосредственно на поверхность соевого агара триптиказеина с добавлением крови или других добавок. Высевается от истощения.
Принимая во внимание, что чашки соевого агара триптиказеина без добавок обычно используются для пересева микробных штаммов (бактерий или дрожжей).
Контроль качества
Контроль стерильности
Чтобы проверить стерильность различных сред, приготовленных на соевом агаре с триптиказеином, рекомендуется сделать следующее: из каждой подготовленной партии одну или две чашки или пробирки следует инкубировать без инокуляции при 37 ° С в течение 24 часов, чтобы продемонстрировать стерильность. Во всех случаях оно должно оставаться без роста.
Если обнаружено загрязнение, вся партия должна быть выброшена.
Контроль роста
Для изучения правильного функционирования соевого агара с триптиказеином можно использовать следующие бактериальные штаммы: Кишечная палочка ATCC 8739, Золотистый стафилококк ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 и Enterococcus faecalis ATCC 29212.
Штаммы высевают и инкубируют при аэробиозе при 37 ° С в течение 24 часов..
Во всех случаях рост должен быть удовлетворительным.
Вы также можете использовать грибы в качестве комплекса Candida Albicans ATCC 10231 и Aspergillus niger ATCC 16404. Ожидается хороший рост для обоих штаммов..
Контроль роста и характер гемолиза триптиказеинового соевого агара с добавлением крови
Для проверки правильного функционирования кровяного агара, приготовленного на этой основе, можно использовать следующие штаммы: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 и Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.
Их высевают и инкубируют при 37 ° С в микроаэрофилике в течение 24 часов..
Во всех случаях рост должен быть удовлетворительным, учитывая, что в S. pyogenes бета-гемолиз (чистый ореол вокруг колонии) и у обоих штаммов S. pneumoniae альфа гемолиз (зеленоватый ореол вокруг колоний) следует соблюдать.
ссылки
- Участники Википедии. Триптиказ Я агар. Википедия, Свободная энциклопедия. 17 декабря 2018 года, 15:47 UTC. Доступно по адресу: https://en.wikipedia.org
- Лаборатории Британии. Тритеин соевый агар. 2015. Доступно по адресу: britanialab.com
- Неоген Лаборатории Соевый триптих. Доступно по адресу: foodsafety.neogen.com
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологическая диагностика Бэйли и Скотта. 12 изд. Аргентина. Panamericana S.A Редакция.
- BD Laboratories Триптиказ Я Агар. 2014. Доступно по адресу: .bd.com