Agar Salmonella-Shigella Foundation, подготовка и использование

Сальмонелла-шигелла агар также известный как агар SS, является умеренно селективной и дифференциальной средой, специально разработанной для выделения энтеропатогенных бактерий родов Salmonella и Shigella, как из окружающей среды, так и из клинических образцов..

Агар СС имеет сложный состав; Он состоит из мясного экстракта, пептона, лактозы, желчных солей, цитрата натрия, тиосульфата натрия, цитрата железа, агара, нейтрально-красного, ярко-зеленого и дистиллированной воды. Учитывая его высокую селективность, можно высаживать образцы с обильной смешанной флорой..

В микробиологических лабораториях среда Salmonella-Shigella широко используется для исследования присутствия Salmonella и Shigella в образцах диарейных фекалий, сточных вод, питьевой воды и продуктов питания..

Иногда необходимо использовать бульоны для предварительного обогащения (бульон из лактозы) и обогащение (бульон из селенита и цистина) для восстановления штаммов сальмонеллы.

Эти шаги требуются, когда существует подозрение на существование сальмонеллы в очень низком количестве, или когда штамм может подвергаться жестокому обращению с помощью процессов, типичных для промышленного производства, в основном, обработанных пищевых продуктов. Желательно также обогатить образцы кала у пациентов, которых лечили антибиотиками..

Впоследствии обогащенный бульон можно посеять на агаре Salmonella-Shigella и других подобных средах, таких как ксилозный агар, дезоксисилоксан-лизин (XLD) и энтеросолюбильный гектоен-агар (HE)..

индекс

• 1 фундамент
  • 1.1 Пищевая ценность
  • 1.2 Согласованность
  • 1.3 Селективный
  • 1.4 Дифференциал
• 2 Подготовка
• 3 Использование
• 4 ограничения
• 5 Контроль качества
• 6 Ссылки

фундамент

Каждый компонент культуральной среды сальмонеллы-шигеллы имеет определенную функцию, и смесь в целом придает ей свойства, которые ее характеризуют.

Питательная сила

Мясной экстракт и пептон (расщепленный казеин и ткани животных) обеспечивают необходимые питательные вещества (азот, углерод и витамины) для развития микроорганизмов, способных переносить остальные компоненты..

консистенция

Агар-агар отвечает за обеспечение твердой консистенции среды.

селективный

Эта среда очень селективна, поскольку содержит соли желчных кислот, цитрат натрия и ярко-зеленый цвет. Следовательно, он подавляет рост всех грамположительных бактерий и большинства грамотрицательных бактерий, включая некоторые кишечные палочки..

В то время как бактерии рода Salmonella и некоторые штаммы шигеллы действительно поддерживают эти соединения.

В основном, род Salmonella очень устойчив к солям желчи, настолько, что они могут жить в желчном пузыре некоторых пациентов-носителей, которые постоянно выводят бактерии через кал..

дифференциал

Лактоза является ферментируемым углеводом, который помогает дифференцировать ферментирующие лактозу штаммы от неферментирующих штаммов. Об этом свойстве свидетельствует наличие индикатора pH, который в этой среде является феноловым красным.

Штаммы, ферментирующие лактозу, дают красные колонии, тогда как неферментирующие штаммы бесцветны. Эта характеристика важна, так как сальмонелла и шигелла не сбраживают лактозу.

С другой стороны, эта среда содержит тиосульфат натрия в качестве источника серы и цитрат трехвалентного железа в качестве источника железа. Оба соединения способны дифференцировать бактерии, способные продуцировать сероводород. Они реагируют с образованием черного осадка нерастворимого и видимого сульфида железа.

Это свойство имеет некоторые штаммы рода Salmonella. Обычно их колонии имеют бесцветную плоскость с черной точкой в ​​центре. Остальные сальмонеллы не производят H₂S и развиваться как бесцветные колонии.

С другой стороны, колонии рода Shigella являются бесцветными плоскими без почернения.

подготовка

Это означает, что очень просто приготовить.

Взвесьте 63 г обезвоженной коммерческой среды и растворите в одном литре дистиллированной воды. Разогрейте раствор и перемешайте. Смесь может достигать кипения до минут.

Эта среда не должна автоклавировать. После растворения его подают непосредственно на одинарные или двойные стерильные тарелки..

При затвердевании они располагаются в перевернутом виде в машинах для изготовления зубного налета и хранятся в холодильнике (2-8 ° C) до использования..

Среда после приготовления должна иметь рН 7,2 ± 0,2 и оранжевый красный.

Важно разрешить темперирование перед посевом образцов. Вы можете непосредственно посеять исходный образец, выгружая материал на часть агара, а затем отфильтровывать от истощения..

В случае использования обогащенных бульонов, передать часть селенитового бульона и посеять с помощью шпателя Дригальски.

Инкубировать при 37 ° С в течение 24 часов при аэробиозе.

Имейте в виду, что количество граммов для взвешивания и конечный pH среды могут варьироваться от одного коммерческого дома к другому. Опорная плита носителя всегда приносит показания к его приготовлению.

использование

Он часто используется при анализе культур кала и в микробиологическом исследовании проб остаточной воды, питьевой воды и пищи.

Часто готовят двойные пластины, с одной стороны помещают агар Salmonella-Shigella, а с другой - агар XLD..

ограничения

-Некоторые штаммы шигеллы не растут в этой среде. Поэтому не рекомендуется для первичной изоляции этого рода.

-Не каждая чистая колония с черным центром указывает на сальмонеллу; биохимические тесты должны быть выполнены, чтобы сделать правильную идентификацию, так как колонии некоторых штаммов Proteus неотличимы от колоний сальмонеллы.

-Обезвоженная среда должна быть осторожна при воздействии окружающей среды, так как она очень гигроскопична. Поэтому его следует хранить в сухом и хорошо закрытом помещении. Открыто на очень короткие периоды.

-Со временем желчные соли в среде могут выпадать в осадок, образуя изображение, похожее на матовое вещество в агаре, но это не влияет на результаты..

-Некоторые штаммы шигеллы могут медленно сбраживать лактозу.

Контроль качества

Чтобы доказать, что среда работает правильно, рекомендуется посадить известные или сертифицированные контрольные штаммы и наблюдать, соответствует ли рост ожидаемым характеристикам..

Для этого используются штаммы Кишечная палочка, Enterobacter sp., Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium или Enterococcus faecalis.

Ожидаемые результаты:

Кишечная палочка --розовые выпуклые колонии.

Энтеробактер и Клебсиелла- большие колонии и красная или розовая слизистая.

Шигелла флекснери --прозрачные или бесцветные плоские колонии.

Salmonella typhimurium - бесцветные колонии с черным центром.

Enterococcus faecalis-- полное торможение.

ссылки

1. Дифко Франциско Сория Мелгуизо Лаборатории. Сальмонелла-Шигелла агар. 2009. Доступно по адресу: f-soria.es
2. БД Лаборатория. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Доступно по адресу: bd.com
3. Лаборатории Британии. Сальмонелла-Шигелла Агар. 2015. Доступно по адресу: britanialab.com
4. Valtek диагностика. Агар сальмонеллы-шигеллы (Агар СС) .2010. Доступно по адресу: andinamedica.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологическая диагностика Бэйли и Скотта. 12 изд. Редакция Panamericana S.A. Аргентина.
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологический диагноз. 5-е изд. Редакция Panamericana S.A. Аргентина.