Агаровая соль и манитол, основа, приготовление и применение



соленый агар и маннит или соленый маннит представляет собой твердую, селективную и дифференцированную культуральную среду. Он был создан Чепменом для выделения патогенных грамположительных кокков, особенно Золотистый стафилококк.

Тем не менее, это также полезно изолировать Стафилококк эпидермидис, которые иногда могут присутствовать в качестве оппортунистического патогена, и Staphylococcus saprophyticus, признанный мочевой патоген, среди других видов.

Некоторые энтерококки способны расти в этой среде, а также некоторые грамположительные спорообразующие бациллы.

Эта среда очень полезна при анализе клинических образцов, но она также используется в микробиологическом исследовании пищевых продуктов и в контроле качества промышленных продуктов, таких как косметика, лекарства и другие..

Соленый маннитовый агар состоит из экстрактов и пептонов из говядины, триптеина, маннита, хлорида натрия, фенолового красного и агара.

индекс

  • 1 фундамент
  • 2 Подготовка
  • 3 использования
  • 4 Контроль качества
  • 5 Заключительные соображения
  • 6 Ссылки

фундамент

Маннитовый агар избирателен благодаря высокой концентрации соли. Соленость действует как ингибирующее вещество и предотвращает рост грамотрицательных бактерий..

Он также является дифференцированным из-за присутствия углеводов маннита и индикатора рН фенолового красного. Из этого бактерии, способные к ферментации маннита, производят кислоты, подкисляя среду, превращая колонии и среду в желтый цвет..

С другой стороны, колонии, которые не ферментируют маннит, растут в среде, принимая питательные вещества, обеспечиваемые экстрактами и пептонами из мяса и триптеины. Оттуда бактерии извлекают углерод, азот, витамины и минералы, необходимые для их роста..

Колонии в этом случае могут быть слабыми или сильными розовыми, а среда остается того же цвета или меняет цвет на фуксию.

Агар - это вещество, обеспечивающее консистенцию среды..

подготовка

Чтобы приготовить один литр соленого агара с маннитом, 111 г дегидратированной среды коммерческого дома предпочтений взвешивают и растворяют в 1000 мл дистиллированной воды, используя фиолу..

Тепло применяется путем частого удаления среды для улучшения процесса растворения. Позвольте этому кипеть в течение минуты.

Поместите фиолу в автоклав при 121 ° С на 15 минут..

По истечении этого времени фиолу вынимают из автоклава, дают ей постоять и подают от 15 до 20 мл на стерильные чашки Петри, когда температура составляет примерно от 50 до 55 ° C..

Разрешается отверждаться, заказывать в перевернутом виде в плакетках и хранить в холодильнике до его использования. Перед посадкой образца необходимо подождать, пока пластина не изменит температуру окружающей среды..

Тарелки высевают через страты или высевают на поверхность шпателем Дригальски. Конечный pH приготовленной среды должен составлять 7,4 ± 0,2.

Цвет обезвоженной среды - светло-бежевый, а цвет приготовленной среды - оранжевый красный.

приложений

Из-за своей высокой селективности эта среда идеально подходит для посадки образцов со смешанной флорой, в которых нужно искать наличие Золотистый стафилококк, в качестве основного возбудителя этого рода.

В этом смысле одним из его наиболее частых применений является микробиологический анализ образцов экссудатов глотки и выделений из носа, особенно для выявления бессимптомных носителей S. aureus.

Некоторые страны внедрили этот анализ в качестве обязательного требования для людей, которые хотят работать в качестве поставщиков продуктов питания.

Этот контроль предотвращает наем людей, которые являются носителями S. aureus, таким образом избегая массового пищевого отравления, из-за потребления продуктов, загрязненных стафилококковым энтеротоксином.

Он также может быть включен в посев раневых инфекций, посевов крови, CSF, бронхоальвеолярного лаважа и др..

Соленый маннитовый агар полезен для повторного выделения колоний культур мочи из агара CLED или кровяного агара, грамм которого выявил грамположительные кокки в кластерах.

Это также применимо в микробиологическом анализе пищевых продуктов, питьевой воды, почвы, среди других применений.

Контроль качества

После того, как партия пластин с соленым маннитовым агаром подготовлена, рекомендуется провести контроль качества. Контрольные штаммы высевают, чтобы показать, есть ли рост или нет.

В качестве положительного контроля известны штаммы Золотистый стафилококк. Он должен расти удовлетворительно, развивая желтые колонии, и среда также становится такой же.

Кроме того, удобно включать известный штамм Стафилококк эпидермидис. Он должен расти удовлетворительно, развивая розовые колонии, и среда остается тем же цветом или темнеет в более сильном розовом.

В качестве отрицательного контроля используются штаммы, которые не должны расти в этой среде. Например, вы можете посадить известный штамм Escherichia coli или Klebsiella pneumoniae. Ожидаемый результат - полное торможение, то есть отсутствие роста.

Кроме того, планшет без инокуляции следует инкубировать. В нем не должно быть ни роста, ни изменения цвета.

Важно, чтобы пластина не использовалась, если есть признаки ухудшения, такие как загрязнение, обезвоживание, обесцвечивание, среди других..

Заключительные соображения

При использовании соленой агаризованной среды с маннитом необходимо учитывать некоторые важные аспекты:

-Получение роста желтых колоний не означает, что это Золотистый стафилококк. Следует помнить, что некоторые штаммы энтерококка способны расти в этой среде и ферментировать маннит, а также некоторые грамположительные спорообразующие бациллы..

Поэтому важно выполнить грамм в колонии и провести тест каталазы..

-С другой стороны, следует учитывать, что другие виды стафилококков отличаются от стафилококк Они также способны ферментировать маннит. Следовательно, важно вырастить колонию до питательного бульона, чтобы взять его оттуда и выполнить тест на коагулазу..

К стафилококкам, имеющим клиническое значение для человека, ферментирующего маннит, относятся: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, среди других.

Другие могут давать переменную реакцию, то есть иногда положительную, а иногда отрицательную. Некоторые из них S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S.medius, среди других.

-Не рекомендуется брать колонии непосредственно из агара с маннитом для проведения теста на коагулазу, так как высокая концентрация соли в среде может повлиять на результат.

-Наконец, рекомендуется инкубировать чашки, засеянные соленым маннитом, до 48 часов из-за того, что некоторые штаммы S. aureus Они могут медленно ферментировать маннит, хотя это не очень часто.

ссылки

  1. Лаборатории Британии. Маннит соленый агар. 2015. Доступно по адресу: britanialab.com
  2. "Соленый маннитовый агар". Википедия, Свободная энциклопедия. 31 октября 2018 года, 19:08 UTC. 17 января 2019, 20:55, доступно по адресу: en.wikipedia.org.
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологический диагноз. (5-е изд.). Аргентина, редакция Panamericana S.A..
  4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологическая диагностика Бэйли и Скотта. 12 изд. Аргентина. Panamericana S.A Редакция
  5. BD Laboratories Б. Д. Маннит Соль Агар. 2013. Доступно по адресу: bd.com.