Питательная агаровая основа, подготовка и использование

питательный агар это неселективная и недифференцированная твердая культуральная среда. В этой среде растут всевозможные бактерии, не требующие с пищевой точки зрения.

Это простое средство и, несмотря на его название, содержит более низкую питательную ценность по сравнению с другими подобными средами, такими как агар для инфузии мозга или соевый агар с триптиказой.

Его полезность в лаборатории очень разнообразна. В основном используется для субкультуры видов, содержания штаммов, подсчета колоний, в качестве основы для приготовления кровяного агара, среди прочего.

Кроме того, из-за его светло-бежевого цвета, производство пигментов, генерируемых некоторыми бактериальными штаммами, такими как зеленоватый пигмент Pseudomonas aeruginosa, кирпично-красный пигмент, производимый Serratia Marcescens при комнатной температуре золотисто-желтый пигмент Золотистый стафилококк, среди других.

Кроме того, это один из самых экономичных растущих средств массовой информации на рынке.

индекс

• 1 фундамент
• 2 Композиция
• 3 Подготовка
• 4 использования
  • 4.1 В качестве основы для приготовления кровяного агара
  • 4.2 Стимулировать споруляцию спорообразующих бактерий
  • 4.3 Техническое обслуживание штамма
  • 4.4 Подсчет колоний
  • 4.5 Выполнение диагностических тестов
  • 4.6 Восстановление мезофильных аэробных рекреационных соленых вод (пляжи)
• 5 ссылок

фундамент

Как уже упоминалось, это очень простое средство, основанное на предоставлении питательных веществ для роста бактерий без ограничений и без сложных реакций для интерпретации..

Поскольку среда является полупрозрачной, она идеально подходит для подсчета колоний методом высева по глубине..

состав

Он состоит в основном из мясного экстракта или дрожжевого экстракта, пептона или панкреатического желатина, агар-агара, хлорида натрия и дистиллированной воды..

Экстракт мяса или дрожжей и пептонов представляет собой источники углерода и основных минералов (азот, фосфор и сера), которые будут использоваться бактериями в качестве источника энергии и факторов роста.

Аналогично, агар-агар является основой всех твердых сред для выращивания, заменяя желатин, который был первым базовым соединением, использованным Робертом Кохом для придания его твердой среде однородной среды..

Агар представляет собой полисахарид, состоящий из галактозы, галактоманнана, агарозы и агаропектина. Устанавливается при 40 ° C и плавится около 100 ° C..

Со своей стороны, хлорид натрия обеспечивает среду осмолярностью, необходимой для развития бактерий..

Наконец, вода служит для гидратации и растворения лиофилизированных соединений. Следует использовать дистиллированную воду, доведенную до нейтрального рН. Водопроводную воду не следует использовать, поскольку она содержит кальций и магний, которые могут реагировать с фосфатами в среде и образовывать нерастворимые соли..

подготовка

Для одного литра питательного агара необходимо взвесить 31 г обезвоженной среды. Его помещают в фиолу и растворяют в литре дистиллированной воды. После 5 минут отдыха разогрейте источник тепла и постоянно перемешивайте, пока он не закипит в течение 1 или 2 минут..

Затем поместите фиолу в автоклав и стерилизуйте при 121 ° С в течение 20 минут..

По истечении этого времени его извлекают из автоклава и подают в стерильные чашки Петри с использованием колпака с ламинарным потоком или горелки Бунзена..

Если чашки Петри одноразовые (пластиковые), среду следует распределить, когда температура агара составляет приблизительно 50 ° C, чтобы предотвратить их деформацию при чрезмерном нагревании..

Дать застыть и хранить в перевернутом держателе тарелок и хранить в холодильнике при 2-8 ° C до использования..

Пластины должны быть закалены перед посевом. Не следует использовать питательные агаровые пластины, если они загрязнены или обезвожены..

РН подготовленной среды должен быть доведен до 7,3 ± 0,2.

приложений

Это самая простая культуральная среда, используемая в лаборатории микробиологии. Его формула отлично подходит для роста нетребовательных бактерий.

Его основное использование объясняется ниже:

В качестве основы для приготовления кровяного агара

Эта среда иногда используется в качестве основы для приготовления кровяного агара, однако она не является наиболее часто используемой основой.

Стимулирует споруляцию спорообразующих бактерий

Эта культуральная среда особенно полезна для стимуляции споруляции спорообразующих бактерий, таких как Bacillus sp.

Для этого высевается штамм рода бацилла и инкубировали в течение 24 часов при 37 ° С при аэробиозе. Как только колонии выращены, пластина подвергается воздействию температурного стресса, то есть температура печи повышается до 44 ° С и остается на 24 часа больше или ее вводят в холодильник на 24 часа..

В конце посева культуры растягивают и окрашивают окраской по Граму или окраской по Шефферу-Фултону. В них будут наблюдаться бациллы с эндоспорами (споры внутри бацилл) и экзоспорами (споры вне бацилл)..

Напряжение обслуживания

Некоторым исследовательским лабораториям или университетским лабораториям поддержки преподавания необходимо как можно дольше поддерживать жизнеспособные клинически важные бактерии, чтобы использовать бактериальный банк (bacteriotheca) для исследовательской работы или для подготовки методик преподавания. Студенты научатся манипулировать и идентифицировать эти микроорганизмы.

Для этой цели можно использовать питательный агар, а также агар для инфузии сердца мозга. Агар готовят, разливают в бакелитовые пробирки и наклоняют на основание таким образом, что агар затвердевает, образуя блок на дне и скос на поверхности (пик флейты).

Каждая пробирка помечена путем размещения названия бактерий, которые будут посажены, и даты. На лицевой панели каждая из бактерий будет посажена и инкубирована в течение 24 часов, после выращивания колоний пробирки хранятся при комнатной температуре..

Бактериотека должна обновляться от 1 до 3 месяцев, чтобы избежать загрязнения и обезвоживания среды, а также гибели бактерий..

Таким способом могут поддерживаться только нетребовательные бактерии..

Подсчет колоний

Хотя существуют специальные средства для подсчета колоний, такие как стандартный агар для подсчета, для этой цели можно использовать питательный агар, высев его на поверхность с помощью шпателя Дригальски или по глубине. Поэтому он очень полезен при микробиологическом анализе пищи и воды..

Выполнение диагностических тестов

Поскольку это среда, которая не содержит крови или каких-либо других добавок, то для проведения теста с каталазой идеально брать колонии, выращенные в этой среде..

Аналогичным образом, благодаря своему чистому цвету, он показан для проведения испытаний оксидазы непосредственно на участке посеянного агара, без помех.

Восстановление мезофильных аэробных рекреационных соленых вод (Пляжи)

Питательный агар, приготовленный с 10% морской водой, полезен для оценки мезофильных аэробов в пляжных водах..

Таким образом, мы можем оценить уровень реального загрязнения воды этими микроорганизмами, поскольку в образцах этого типа результаты перекрываются при использовании питательных сред, приготовленных традиционным способом..

Это было продемонстрировано Кортесом и соавт. в 2013 году в исследовательской работе.

Это объяснимо из-за резких изменений, которым подвергаются бактерии при переходе из среды с повышенной соленостью в среду с низким содержанием соли, поэтому микроорганизмы вступают в состояние летаргии, в которой они жизнеспособны, но не способны к культивированию.

ссылки

1. «Питательный агар». Википедия, Свободная энциклопедия. 13 сентября 2016, 20:33 UTC. 29 декабря 2018 года, 21:04 ru.wikipedia.org
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологическая диагностика Бэйли и Скотта. 12 изд. Аргентина. Panamericana S.A Редакция.
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологический диагноз. (5-е изд.). Аргентина, редакция Panamericana S.A..
4. Кортез Й., Руис Й., Медина Л., Вальбуена О. Влияние питательных сред, приготовленных с морской водой, на показатели здоровья в морских водах курортов Чичиривиче, штат Фалькон, Венесуэла. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
5. Паредес В., Диас В., Сильва де Алмейда М. и Кардосо М. Микробиологическое качество воды для осеменения, для суино.Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
6. Гарсия П., Паредес Ф., Фернандес дель Баррио М. (1994). Практическая клиническая микробиология. Университет Кадиса, 2-е издание. Издательская служба УЦА.