MacConkey Agar Foundation, подготовка и использование

Макконки агар Это твердая культуральная среда, которая позволяет исключить выделение грамотрицательных бактерий. По этой причине это селективная среда, которая также позволяет различать ферментирующие и неферментирующие бациллы лактозы, что делает ее дифференциальной средой. Это одна из наиболее широко используемых питательных сред в лаборатории микробиологии..

Эта среда используется в основном для выделения грамотрицательных бактерий, принадлежащих к семейству Enterobacteriaceae, включая оппортунистические и энтеропатогенные виды.

Его также можно использовать для выделения других кишечных палочек, которые обитают в желудочно-кишечном тракте, но не относятся к Enterobacteriaceae, в качестве Aeromonas sp., Plesiomonas sp., среди других.

Наконец, он может выделить другие грамотрицательные неферментирующие глюкозные палочки, которые обнаружены в окружающей среде, воде или почве, но которые иногда могут быть патогенными микроорганизмами, такими как Pseudomonas sp, Acinetobacter sp., Alkaline sp., Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia., среди других.

индекс

• 1 фундамент
  • 1.1 Макконки Агар
• 2 Подготовка
• 3 использования традиционного агара Макконки
• 4 Другие варианты агара Макконки
  • 4.1 MacConkey агар с сорбитом
  • 4.2 Агар Макконки без кристаллического фиолетового или соли
  • 4.3 Агар Макконки с цефоперазоном
  • 4.4 MacConkey Agar, приготовленный с 10% морской водой по объему
• 5 ссылок

фундамент

Макконки Агар

Основание этого средства может быть объяснено через описание его компонентов, потому что у каждого есть цель, которая определяет его свойство.

Соли желчи и кристалл фиалки

В этом смысле агар Макконки имеет сложную композицию. Прежде всего, он содержит желчные соли и кристаллический фиолетовый.

Эти элементы ответственны за ингибирование роста грамположительных бактерий и некоторых требовательных грамотрицательных бактерий. Это, в свою очередь, способствует развитию грамотрицательных палочек, которые не подвержены воздействию этих веществ. Вот почему это селективная среда.

Говорят, что он является слегка селективным по сравнению с другими средами, которые также ингибируют рост грамположительных бактерий, а также большинства грамотрицательных бактерий..

Он чрезвычайно избирателен для определенного рода, такого как агар TCBS, для выделения Vibrio cholerae и другие подобные галофильные и алкалофильные виды.

Пептоны, полипектоны и лактоза

Содержит вещества, которые обеспечивают необходимые питательные вещества для микроорганизмов, которые развиваются в этой среде, такие как пептоны, полипектоны и лактоза.

Лактоза является ключевым моментом для среды, чтобы быть дифференцированной средой, потому что микроорганизмы, которые обладают способностью ферментировать лактозу, разовьют сильные розовые колонии.

Некоторые бактерии могут медленно или слабо ферментировать лактозу, образуя бледно-розовые колонии и оставаясь положительной лактозой..

Те, кто не ферментирует лактозу, используют пептоны в качестве источника энергии, производя аммиак, подщелачивая среду. Поэтому колонии, которые происходят, являются бесцветными или прозрачными.

Индикатор PH

Изменение цвета достигается с помощью другого необходимого соединения с агаром МакКонки. Это соединение является индикатором pH, который в этом случае имеет нейтральный красный цвет..

Ферментация лактозы приводит к образованию смешанных кислот. Они подкисляют среду при рН ниже 6,8..

Это заставляет индикатор pH поворачивать к интенсивному розовому оттенку. Интенсивность цвета может варьироваться в зависимости от конечного рН.

Дистиллированная вода, хлорид натрия и агар

С другой стороны, он содержит дистиллированную воду и хлорид натрия, которые обеспечивают гидратацию и осмотическое равновесие среды. Наконец, среда содержит агар, который является основой, обеспечивающей консистенцию твердой среды.

Приготовленная агаровая среда МакКонки должна иметь конечный рН, установленный на 7,1 ± 0,2..

подготовка

На один литр агара Макконки следует взвесить 50 г обезвоженной среды, затем поместить в фиолу и растворить в одном литре дистиллированной воды. После 10 минут отдыха его нагревают постоянным перемешиванием до кипения в течение 1 минуты..

Затем поместите фиолу в автоклав и стерилизуйте при 121 ° С в течение 20 минут. По прошествии времени его извлекают из автоклава и дают ему остыть до температуры 45 ° С, затем подают в стерильные чашки Петри внутри капота с ламинарным потоком или перед горелкой Бунзена..

Дать застыть и хранить в перевернутом держателе тарелок и хранить в холодильнике при 2-8 ° C до использования..

Для получения агара Макконки, который ингибирует эффект скопления, производимый родом Proteus, используется агар Макконки с низким содержанием соли..

Использование обычного агара MacConkey

Агар МакКонки включен во все наборы питательных сред, предназначенных для посева клинических образцов, полученных в лаборатории. Это также полезно в пищевой микробиологии и экологической микробиологии.

Разнообразные грамотрицательные бациллы, которые растут в этой среде, проявляют фенотипические характеристики, которые помогают предположить диагноз данного вида. Например, размер, цвет, консистенция и запах колоний являются одними из характеристик, которыми могут руководствоваться.

В этой среде виды Кишечная палочка, Klebsiella sp и Enterobacter sp образуют сильные розовые колонии, окруженные областью выпавшей желчи.

В такой же степени бактерии, как Citrobacter sp., Providencia sp., Serratia sp. И Hafnia sp. они могут появиться без цвета через 24 часа или бледно-розовыми через 24-48 часов.

Аналогично, роды Proteus, Edwadsiella, Salmonella и Shigella дают бесцветные или прозрачные колонии..

Другие варианты агара Макконки

Существуют и другие варианты агара Макконки, которые имеют конкретные цели. Далее они упоминаются:

MacConkey агар с сорбитом

Эта среда была разработана для различения энтеропатогенного штамма (Кишечная палочка энтерогеморрагический O157: H7) остальных штаммов Кишечная палочка.

Эта среда заменяет углеводную лактозу на сорбитол. Штаммы Кишечная палочка энтерогеморрагические O157: H7 отличаются от остальных, потому что они не ферментируют сорбит и, следовательно, получают прозрачные колонии, однако остальные штаммы Кишечная палочка если они сбраживают сорбитол и колонии ярко-розового цвета.

Агар Макконки без кристаллического фиолетового или соли

Этот агар сильно отличается от классического агара МакКонки, так как в нем нет кристаллического фиолетового, могут размножаться грамположительные бактерии..

С другой стороны, отсутствие соли препятствует появлению роения на агаре, продуцируемом некоторыми кишечными палочками, такими как бактерии рода. Протей, и, таким образом, облегчают выделение всех присутствующих бактерий, включая грамположительные бактерии.

Агар Макконки с цефоперазоном

Этот вариант агара Макконки был разработан для первоначальной изоляции Laribacter Гонконгенсис и позже они поняли, что это было полезно для изоляции Аркобактер буцлери.Оба имеют слегка изогнутые отрицательные грамотрицательные бациллы, устойчивые к цефоперазону.

Эти бактерии были недавно связаны как причины гастроэнтерита и диареи, приобретенных у азиатских и европейских людей, которые становятся двумя мощными возбудителями.

Антибиотик позволяет подавлять сопутствующую флору желудочно-кишечного тракта, что способствует развитию этих бактерий, не давая им оставаться незамеченными, так как для их роста требуется 72 часа..

Агар Макконки, приготовленный с 10% морской водой по объему

Этот вариант полезен для оценки показателей бактериального здоровья фекальных загрязнений, в том числе общих колиформ и фекальных колиформ в соленых водах для отдыха (на пляжах и в бухтах)..

Кортез и др. 2013 показали, что среда, приготовленная таким образом, значительно увеличивает извлечение этих микроорганизмов в солевой среде по сравнению с использованием агара Макконки, приготовленного с дистиллированной водой..

Это связано с тем, что модифицированная среда стимулирует рост бактерий, которые физиологически находятся в состоянии покоя, «жизнеспособного, но не пригодного для культивирования», поэтому их невозможно восстановить в обычных средах..

ссылки

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. Использование цефоперазона агара MacConkey для селективного выделения Laribacter Гонконгенсис. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. "Макконки Агар". Википедия, Свободная энциклопедия. 4 апреля 2018 года, 18:16 UTC. 29 декабря 2018, 15:22 en.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологическая диагностика Бэйли и Скотта. 12 изд. Аргентина. Panamericana S.A Редакция.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологический диагноз. (5-е изд.). Аргентина, редакция Panamericana S.A..
5. Кортез Й., Руис Й., Медина Л., Вальбуена О. Влияние питательных сред, приготовленных с морской водой, на показатели здоровья в морских водах курортов Чичиривиче, штат Фалькон, Венесуэла. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
6. Гарсия П., Паредес Ф., Фернандес дель Баррио М. (1994). Практическая клиническая микробиология. Университет Кадиса, 2-е издание. Издательская служба УЦА.