Цетримидный агаровый фундамент, подготовка, использование



цетримидный агар или цетримид представляет собой селективную твердую культуральную среду, предназначенную для выделения Pseudomonas aeruginosa. Он основан на освещении производства пигментов, характерных для этого вида, и был разработан на основе модификации агара Tech, созданной Кингом, Уордом и Реней..

Исходная формула содержала соли хлорида магния, сульфат калия, желатин в пищеварительной системе и агар-агар. Модификация формулы состояла из добавления цетримида (цетилтриметиламмонийбромида) и глицерина..

Цетримидный агар полезен для микробиологического исследования образцов, в которых присутствует Pseudomonas aeruginosa. Следует отметить, что эта бактерия имеет большое значение, потому что, хотя она является частью нормальной микробиоты окружающей среды, она часто ведет себя как оппортунистический патоген..

Таким образом, одной из наиболее распространенных проблем, вызываемых этим микроорганизмом, являются внутрибольничные инфекции, то есть те, которые возникают в больничной среде, когда они поражают пациентов с подавленной иммунной системой..

С другой стороны, из-за близости этого микроорганизма к влажности наиболее уязвимыми объектами загрязнения являются: вспомогательное дыхательное оборудование, лекарства, небулайзеры, источники воды, кондиционеры, дезинфицирующие средства, мыльные растворы, растворы для инъекций, открытые раны. , катетеры, мочевые катетеры, среди других.

В этом смысле цетримидный агар полезен для проведения микробиологического контроля и посева на элементы, ранее названные.

индекс

  • 1 фундамент
    • 1.1 Интерпретация
  • 2 Подготовка
  • 3 использования
  • 4 отобранных
  • 5 ограничений
  • 6 Контроль качества
  • 7 ссылок

фундамент

Цетримидный агар основан на способности среды стимулировать рост P. aeruginosa, стимулировать выработку своих пигментов и, в свою очередь, подавлять рост других микроорганизмов.

Эти свойства обусловлены функцией, которую выполняет каждый из его компонентов. Присутствующий желатиновый пептон служит источником азота, витаминов и минералов. Глицерин или глицерин работает как источник углерода.

В свою очередь, цетримид (цетилтриметиламмонийбромид) является веществом, которое подавляет рост других бактерий, кроме P. aeruginosa, включая другие виды, принадлежащие к тому же роду.

Ингибирование происходит потому, что цетрамид действует как катионное моющее средство, дестабилизируя плазматическую мембрану большинства бактерий, за исключением P. aeruginosa и некоторые другие, которым удается выжить.

С другой стороны, он содержит хлорид магния и сульфат калия. Эти соединения стимулируют фенотипическую экспрессию, связанную со способностью Pseudomonas aeruginosa производства различных пигментов, среди них: пиоцианин, пиовердин, пиорубин, пиомеланин и флуоресцеин. Наконец, он содержит агар-агар, который придает ему твердую консистенцию.

интерпретация

Интерпретация роста, полученного на этом агаре, производится следующим образом:

Наблюдение за круглыми, гладкими колониями с правильными краями, производящими сине-зеленые, зеленые, коричневые или красноватые пигменты, а также выделение фруктового запаха (аминоацетофенона), является предполагаемым результатом присутствия этой бактерии в указанном образце..

С другой стороны, это свидетельствует о P. aeruginosa наблюдение яркого желтовато-зеленого пигмента на колониях при воздействии ультрафиолетового света на чашку.

Следует отметить, что каждый наблюдаемый цвет обусловлен выработкой определенного пигмента. Сине-зеленый пигмент соответствует выработке пиоцианина, от зеленого до пиовердина, от красноватого до пиоррубина, от коричневого до пиомеланина и яркой желтовато-зеленой флуоресценции при ультрафиолетовом излучении до флуоресцеина.

подготовка

Взвесить 43 г обезвоженной среды и растворить в дистиллированной воде. Добавьте 10 мл глицерина. Отнесите смесь к источнику тепла. Дайте настояться несколько минут до полного растворения.

Автоклав при 121 ° С в течение 15 минут. Дайте постоять и подайте в стерильных чашках Петри при температуре около 50 ° C..

Дать застыть, перевернуть, упорядочить по доскам и хранить в холодильнике до использования. Чтобы посадить чашки с цетримидным агаром, их следует заранее извлечь из холодильника и дать им принять комнатную температуру..

Конечный pH среды должен составлять 7,2 ± 0,2..

Цвет обезвоженной среды бежевый, а препарат непрозрачный белый.

приложений

Цетримидный агар можно использовать для посадки всех типов образцов, в которых присутствует Pseudomonas aeruginosa. Поэтому он полезен во всех областях микробиологии (экологическая, промышленная, клиническая, водная и пищевая)..

Очень важно проанализировать условия в больнице и, таким образом, иметь возможность применять корректирующие средства, поскольку этот микроорганизм достигает пациентов через оборудование, лекарства, растворы и загрязненные материалы, которые используются пациентом..

Таким образом, микроорганизм может заразить нижние дыхательные пути, мочевыводящие пути и раны пациентов с иммуносупрессией..

Подсчет колоний также может быть сделан P. aeruginosa в микробных предельных тестах.

посаженный

Цетримидный агар можно использовать в качестве первичной культуры. Пластина инокулируется в одном из ее краев, и оттуда она истощается до остальной части пластины. Жидкие образцы можно высевать на поверхность с помощью шпателя Дригальски..

Планшеты инкубируют при аэробиозе при 37 ° С в течение 24 часов инкубации..

ограничения

-Небольшой процент штаммов  Pseudomonas aeruginosa не производят пиоцианин, поэтому вы можете интерпретировать ложный негатив.

-Некоторые виды Pseudomonas, имеющие клиническое значение, ингибируются в этой среде.

-Несмотря на соблюдение характеристик, описанных для Pseudomonas aeruginosa, они должны быть подтверждены дополнительными идентификационными тестами. Тест, который не должен отсутствовать - это тест на оксидазу, он должен быть положительным.

-Некоторые энтеробактерии могут расти в этой среде и образовывать желтый пигмент, но он отличается от Pseudomonas aeruginosa в котором при воздействии на пластину ультрафиолетового света нет флуоресценции.

-Serratia Marcescens удается развиваться и производит розовый пигмент.

-Если бляшки, засеянные цетримидным агаром, выдерживают какое-то время при комнатной температуре, штаммы P. aeruginosa они могут потерять флуоресценцию, наблюдаемую в ультрафиолетовом свете, однако свойство восстанавливается, если его повторно инкубировать при 37 ° C..

Контроль качества

Для проверки правильности функционирования цетримидного агара можно использовать контрольные штаммы, такие как: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Кишечная палочка ATCC 25922 и Золотистый стафилококк ATCC 25923.

Ожидаемые результаты:

  • в P. aeruginosa хороший рост, с сине-зеленоватым пигментом и положительным флуоресцеином.
  • S. maltophilia и S. aureus будет частично или полностью заблокирован.
  • Ожидается, что Кишечная палочка быть полностью подавленным.

ссылки

  1. Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S. Фенотипическая и серологическая характеристика клинических изолятов из Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
  2. Лаборатории Конда Пронадиса. Цетримидная агаровая основа. 2014. Доступно по адресу: condalab.com
  3. Лаборатории Британии. Цетримидный агар. 2015. Доступно по адресу: britanialab.com
  4. BD Laboratories BD псевдоселевый агар (цетримидный агар). 2013. Доступно по адресу: bd.com
  5. Лаборатория Франциско Сории Мелгуизо, C.A. Цетримидный агар. 2009. Доступно по адресу: http://f-soria.es