Поделиться:
Методика ионообменной хроматографии, принципы
ионообменная хроматография является аналитической техникой, основанной на принципах хроматографии для разделения ионных и молекулярных частиц, проявляющих полярность. Это основано на предпосылке, насколько похожи эти вещества по отношению к другому, называемому ионообменнику..
В этом смысле вещества, которые имеют электрический заряд, разделяются благодаря ионному смещению, при котором один или несколько ионных частиц переносятся из жидкости в твердое вещество путем обмена из-за наличия равных зарядов.
Эти ионные частицы связаны с функциональными группами, расположенными на поверхности, посредством электростатических взаимодействий, которые облегчают ионный обмен. Кроме того, эффективность разделения ионов зависит от скорости обмена веществ и баланса между обеими фазами; то есть на основе этого перевода.
индекс
- 1 процедура
- 1.1 Предыдущие соображения
- 1.2 Процедура
- 2 принципа
- 3 Приложения
- 4 Ссылки
процесс
Перед началом процесса ионообменной хроматографии следует учесть определенные факторы, имеющие большое значение, которые позволяют оптимизировать разделение и получить лучшие результаты.
К числу этих элементов относятся количество аналита, молярная масса или молекулярная масса образца и нагрузка видов, составляющих аналит..
Эти факторы необходимы для определения параметров хроматографии, таких как стационарная фаза, размер колонки и размеры пор матрицы, среди других.
Предыдущие соображения
Существует два типа ионообменной хроматографии: та, которая включает катионное смещение, и та, которая включает анионное смещение..
В первом случае подвижная фаза (составляющая образец, подлежащий отделению) содержит ионы с положительным зарядом, а стационарная фаза - ионы с отрицательным зарядом.
В этом случае виды с положительным зарядом притягиваются стационарной фазой в зависимости от их ионной силы, и это отражается на времени удерживания, показанном на хроматограмме..
Точно так же в хроматографии, включающей смещение анионов, подвижная фаза имеет отрицательно заряженные ионы, в то время как стационарная фаза имеет положительно заряженные ионы..
Другими словами, когда неподвижная фаза имеет положительный заряд, она используется для разделения анионных частиц, а когда эта фаза имеет анионный характер, она используется для разделения катионных частиц, присутствующих в образце..
В случае соединений, которые представляют электрический заряд и проявляют растворимость в воде (таких как аминокислоты, мелкие нуклеотиды, пептиды и большие белки), они объединяются с фрагментами, которые имеют противоположный заряд, образуя связи ионной природы с фазой стационарный, не растворимый.
процесс
Когда неподвижная фаза находится в равновесии, существует функциональная группа, которая подвержена ионизации, в которой вещества, представляющие интерес в образце, разделены и определены количественно и могут быть объединены при движении вдоль колонки. хроматографический.
Впоследствии виды, которые были объединены, могут быть элюированы, а затем собраны с использованием элюента. Это вещество состоит из катионных и анионных элементов, что приводит к увеличению концентрации ионов вдоль колонны или изменению характеристик рН того же самого.
Таким образом, сначала разновидность, способная обменивать ионы, положительно заряжена противоионами, а затем производится комбинация ионов, которые будут секретироваться. Когда начинается процесс элюирования, слабосвязанные ионные частицы подвергаются десорбции.
После этого ионные частицы с более сильными связями также десорбируются. Наконец, происходит регенерация, при которой возможно восстановление исходного состояния посредством промывки колонки забуференными веществами, которые первоначально вмешиваются..
начало
Ионообменная хроматография основана на том факте, что виды, которые проявляют электрический заряд, присутствующий в аналите, разделяются благодаря силам притяжения электростатического типа, когда они перемещаются через смолистое вещество ионного типа в Особые условия температуры и pH.
Эта сегрегация вызвана обратимым обменом ионных частиц между ионами, обнаруженными в растворе, и ионами, обнаруженными в смолистом вытесняющем веществе, которое имеет ионную природу..
Таким образом, процесс, используемый для разделения соединений в образце, зависит от типа смолы, которая используется, в соответствии с принципом анионного и катионообменников, описанным выше..
Поскольку представляющие интерес ионы заключены в смолистое вещество, возможно, что хроматографическая колонка будет течь до тех пор, пока остальная часть ионных частиц не будет элюирована.
Впоследствии ионным частицам, заключенным в смолу, дают возможность течь, перемещаясь через подвижную фазу с большей реакционной способностью вдоль колонны..
приложений
Поскольку в этом типе хроматографии разделение веществ осуществляется за счет ионного обмена, оно имеет большое количество применений и применений, среди которых следующие:
- Разделение и очистка образцов, содержащих комбинации соединений органической природы, состоящих из таких веществ, как нуклеотиды, углеводы и белки.
- Контроль качества при обработке воды и в процессах деионизации и умягчения растворов (используемых в текстильной промышленности), а также при выделении магния и кальция.
- Разделение и очистка лекарств, ферментов, метаболитов, присутствующих в крови и моче, и других веществ, обладающих щелочными или кислотными свойствами, в фармацевтической промышленности.
- Деминерализация растворов и веществ, где желательно получить соединения высокой чистоты.
- Выделение определенного соединения в образце, который вы хотите разделить, чтобы получить его предварительное разделение, которое впоследствии будет подвергнуто дальнейшему анализу..
Кроме того, этот аналитический метод широко используется в нефтехимической, гидрометаллургической, фармацевтической, текстильной, пищевой и напитков, а также полупроводниковой промышленности, среди других областей..
ссылки
- Wikipedia. (Н.Д.). Ионная хроматография. Получено с en.wikipedia.org
- Биохем Ден. (Н.Д.). Что такое ионообменная хроматография и ее применения. Получено с biochemden.com
- Читайте Учеба. (Н.Д.). Ионообменная хроматография | Принцип, метод и применение. Получено с studyread.com
- Введение в практическую биохимию. (Н.Д.). Ионообменная хроматография. Получено от elte.prompt.hu
- Helfferich, F.G. (1995). Ионный обмен. Получено из books.google.co.ve