Что такое простое окрашивание? Основные характеристики



простое окрашивание это быстрая и простая процедура окрашивания, при которой используется один краситель, поэтому она называется простой. Он в основном используется для определения морфологии и организации клеток, присутствующих в образце.

Естественно, клетки не имеют цвета, поэтому необходимо, чтобы они были видны каким-либо образом, когда они наблюдаются в микроскопе..

Важно подчеркнуть, что красители, используемые при простом окрашивании, должны быть основными с положительным зарядом (катионным), чтобы они могли спонтанно связываться с клеточной стенкой и цитоплазмой.

Эти клеточные структуры заряжены отрицательно. Вот почему краситель с положительным зарядом притягивается к клеткам и самопроизвольно связывается с ними. Таким образом, все клетки, присутствующие в образце, быстро окрашиваются.

Красители, используемые при простом окрашивании

Существует несколько основных красителей, которые можно использовать в лаборатории микробиологии. Наиболее используемыми являются:

- Метиленовый синий.

- Кристально фиолетовый.

- Малахитовый зеленый.

- Основной фуксин.

Все эти красители хорошо работают в бактериях, потому что они имеют положительно заряженные (катионные) окрашенные ионы (хромофоры).

Время окрашивания для большинства из этих красителей относительно короткое. Они обычно варьируются от 30 секунд до 2 минут, в зависимости от сродства красителя.

Важно помнить, что перед окрашиванием образца простым окрашиванием его необходимо удлинить и закрепить на предметном стекле (предметное стекло); Расширенный и фиксированный образец называется мазком.

6 шагов для выполнения простого окрашивания

Шаг 1

Поместите слайд на стойку для окрашивания и нанесите желаемый краситель. Оставьте соответствующее время.

Обычно, простое окрашивание занимает несколько секунд или пару минут, в зависимости от используемой окраски..

наблюдение

На этом этапе важно не превышать рекомендованное время для используемого красителя, так как на листе могут образовываться кристаллы, образующие так называемые «артефакты», которые искажают морфологию клеток..

Шаг 2

Тщательно промойте мазок предметного стекла дистиллированной водой из бутылки или также водой из-под крана, которая течет медленно, пока сток не станет прозрачным. Обычно это занимает от 5 до 10 секунд.

наблюдение

Не наносите струю воды непосредственно на мазок, чтобы сила не повредила образец..

Если у вас нет дистиллированной воды, вы можете без проблем использовать водопроводную воду, так как это не повлияет на результат окрашивания..

Шаг 3

Просушите предметное стекло с помощью бумажных полотенец в одном направлении и без трения. Убедитесь, что нижняя часть слайда чистая.

Шаг 4

Соблюдайте запятнанный мазок в микроскопе. Начните с самых отдаленных целей, чтобы правильно найти область, которую вы хотите наблюдать более подробно. Изменить цель, чтобы стать ближе и ближе к образцу.

наблюдение

Для использования объектива с наибольшим увеличением (обычно 100X) следует использовать иммерсионное масло, так как оно помогает лучам лучше проникать и изображение становится более четким. Не нужно использовать покровное стекло.

Шаг 5

Наконец, выбросьте все образцы в соответствующий контейнер, который должным образом помечен как «биологическая опасность»..

ссылки

  1. (2001). Микробиологические применения: лабораторное пособие по общей микробиологии (8 го ред.). МакГроу-Хилл Компании.
  2. Хариша С. (2006). Введение в практическую биотехнологию (1улица). Firewall Media.
  3. Мойес, Р. Б., Рейнольдс, J. & Breakwell, D. P. (2009). Предварительное окрашивание бактерий: простые пятна. Современные протоколы в микробиологии, (SUPPL 15), 1-5.
  4. Поммервилль, Дж. (2013). Лаборатория основ микробиологии Алькамо (10го). Джонс и Бартлетт.
  5. Прескотт Х. (2002). Лабораторные занятия по микробиологии (5 го). МакГроу-Хилл Компании.
  6. Сумбали Г. и Мехротра Р. (2009). Основы микробиологии (1улица). Тата МакГроу-Хилл Образование.