Типы биохимических тестов, для чего они нужны и какое значение

биохимические тесты в микробиологии они представляют собой набор химических тестов, которые проводятся на микроорганизмах, присутствующих в образце, для их идентификации; Эти микроорганизмы обычно являются бактериями. Существует большое количество биохимических тестов, доступных для микробиолога.

Тем не менее, выбор этих тестов основан на предварительных результатах, таких как картина окраски по Граму и признаки роста, которые позволяют бактериям относиться к определенной категории. Биохимические тесты основаны главным образом на метаболических свойствах каждого типа бактерий.. 

Не все бактерии имеют одинаковые свойства, поэтому исследуют, имеют ли они какой-либо конкретный фермент, добавляя субстрат и ожидая реакции. Обычно это определение определяется изменением цвета или pH в культуральной среде..

Для надежной идентификации бактерии до уровня вида часто требуется менее 15 биохимических тестов. Выполнение большего количества биохимических тестов может повысить уверенность в идентификации.

Большинство из этих биохимических тестов проводятся в сыворотке или плазме крови. Тем не менее, они также могут быть выполнены в других биологических выделениях, таких как моча, спинномозговая жидкость, плевральная жидкость и стул, среди других..

индекс

• 1 Классификация
  • 1.1 Универсальный
  • 1.2 Дифференциалы
  • 1.3 Конкретный
• 2 Типа биохимических тестов
  • 2.1 Тест каталазы
  • 2.2 Тест на оксидазу
  • 2.3 Испытание соленого маннит-агара (MSA)
  • 2.4 Коагулазный тест
  • 2.5 Тест на уреазу
• 3 Для чего нужны биохимические тесты??
• 4 Важность
• 5 ссылок

классификация

Биохимические тесты можно разделить на 3 группы:

универсальный

Это тесты, которые могут быть выполнены на любом образце и которые направляют микробиолога на следующие биохимические тесты, которые необходимо выполнить, чтобы получить надежную идентификацию..

пример

Тест каталазы и оксидазы.

дифференциалы

Это тесты, которые проводятся для выявления микроорганизмов, присутствующих в образце до уровня видов.

Идентификация производится на основе результатов комбинации тестов, поскольку отдельные результаты не достаточно информативны, чтобы сделать идентификацию.

пример

IMViC тесты и тесты на утилизацию сахара.

специфические

Это специфические тесты для определенного набора видов или для подтипа вида. Эти тесты обычно проводятся для подтверждения или идентификации на уровне подвидов. Индивидуальные тесты сами по себе информативны.

пример

Тест на γ-глутамиламинопептидазу.

Типы биохимических тестов

Тест каталазы

Каталазный тест - это тест, демонстрирующий присутствие фермента каталазы путем разложения перекиси водорода на кислород и воду. Небольшое количество бактерий добавляется к капле перекиси водорода (3%) на слайде.

Тест на каталазу - это простой тест, используемый микробиологами для определения видов бактерий и определения способности некоторых микробов расщеплять перекись водорода путем производства фермента каталазы..

Если наблюдаются пузырьки кислорода, это означает, что бактерия обладает ферментом каталазы, потому что она катализирует разложение перекиси водорода на кислород и воду. Тогда говорят, что организм является положительным каталазой (например: Золотистый стафилококк).

Тест на оксидазу

Этот тест используется для идентификации микроорганизмов, которые содержат фермент цитохромоксидазу (важный в цепи транспорта электронов). Обычно используется для различия между семействами Enterobacteriaceae и Pseudomadaceae..

Цитохромоксидаза переносит электроны из цепи переноса электронов в кислород (конечный акцептор электронов) и восстанавливает его до воды. Тесты на оксидазу дают искусственные молекулы доноров и акцепторов электронов.

Когда донор электронов окисляется под действием цитохромоксидазы, среда становится темно-фиолетовой и считается положительным результатом. Микроорганизм Pseudomonas aeruginosa является примером положительной оксидазы бактерии.

Соленый маннитовый агаровый тест (MSA)

Этот тип теста является выборочным и дифференциальным. MSA выберет организмы, способные жить в средах с высокой концентрацией соли, таких как виды стафилококк в отличие от видов стрептококк, чей рост тормозится в этих условиях.

Дифференциальным компонентом в этом тесте является сахарный маннит. Организмы, способные использовать маннит в качестве источника пищи, будут производить побочные продукты брожения, которые являются кислыми и, следовательно, будут понижать рН среды.

Кислотность среды приводит к тому, что индикатор pH, феноловый красный, желтеет. Примерами видов бактерий, которые можно дифференцировать этим методом, являются: Золотистый стафилококк (положительно, потому что он ферментирует маннит) и Стафилококк эпидермидис (отрицательно, потому что маннит не ферментируется).

Коагулазный тест

Коагулаза - это фермент, который помогает свертывать плазму крови. Этот тест проводится на положительных грамположительных и каталаз-положительных бактериях для выявления Золотистый стафилококк (положительная коагулаза) На самом деле, коагулаза является фактором вирулентности этого вида бактерий..

Образование сгустков вокруг инфекции, вызванной этой бактерией, вероятно, защищает ее от фагоцитоза. Этот тест очень полезен, когда вы хотите различить Золотистый стафилококк других видов стафилококк которые являются негативной коагулазой.

Тест на уреазу

Этот тест используется для выявления бактерий, способных гидролизовать мочевину, с помощью фермента уреазы. Обычно используется для различения пола Протей других кишечных бактерий.

Гидролиз мочевины производит аммиак как один из его продуктов. Это слабое основание увеличивает pH среды выше 8,4, а индикатор pH (феноловый красный) меняется с желтого на розовый. Примером положительной уреазной бактерии является Proteus mirabilis.

Для чего нужны биохимические тесты??

Биохимические тесты в микробиологии используются для диагностики заболеваний, вызванных микробами, и для мониторинга лечения, направленного на борьбу с ними. Кроме того, они используются для скрининга инфекционных заболеваний и для их прогноза..

Биохимическая идентификация микроорганизмов дает представление о том, на что способны эти микроорганизмы, поскольку возможно различение разных штаммов одного и того же вида по определенным биохимическим профилям..

Различия в специфических ферментативных действиях сообщают об экологии, физиологии или естественной среде обитания микроорганизма, что в некоторых случаях может считаться важной информацией.

важность

Структурные различия в отношении формы, размера и расположения бактерий очень мало помогают в процессе идентификации, поскольку существует много видов бактерий, которые имеют сходную форму, размер и расположение..

По этой причине, в конечном счете, идентификация бактерий основана главным образом на различиях в их биохимической активности..

Каждый вид бактерий обладает четко определенным набором метаболических активностей, отличным от всех других видов. Эти биохимические «отпечатки пальцев» являются свойствами, контролируемыми бактериальными ферментами.

Таким образом, биохимические тесты важны, потому что они помогают исследователю правильно идентифицировать патогенные микроорганизмы, присутствующие в образце, и, таким образом, иметь возможность рекомендовать соответствующее лечение пациенту..

ссылки

1. Беккет Г., Уокер С. и Рей, П. (2010). Клиническая Биохимия (8-е изд.). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, P.H. & Cowan, S.T. (1952). Биохимические методы для бактериологии. Журнал общей микробиологии, 6(1952), 187-197.
3. Гоу А., Мерфи М., Сривастава Р., Коуэн Р., Ст. Д. и О'Рейли Дж. (2013). Клиническая Биохимия (5-е изд.). Elsevier Health Sciences.
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Практическое пособие по микробиологии (2-е изд.). CRC Press.
5. Харриган В. (1998). Лабораторные методы в пищевой микробиологии (3-е изд.). Академическая пресса.
6. Васантхакумари Р. (2009). Практическая микробиология. BI Publications Pvt Ltd.