Нефелометрия, в чем она состоит и применения



нефелометрия состоит в измерении излучения, вызванного частицами (в растворе или в суспензии), таким образом измеряя мощность рассеянного излучения под углом, отличным от направления падающего излучения.

Когда частицы в суспензии достигаются лучом света, часть света отражается, другая часть поглощается, другая часть отклоняется, а остальная часть передается. Вот почему, когда свет попадает на прозрачную среду, в которой находится взвесь твердых частиц, взвесь наблюдается облачно.

индекс

  • 1 Что такое нефелометрия??
    • 1.1 Дисперсия излучения частицами в растворе
    • 1.2 нефелометр
    • 1.3 Отклонения
    • 1.4 Метрологические характеристики
  • 2 Приложения
    • 2.1 Обнаружение иммунных комплексов
    • 2.2 Другие приложения
  • 3 Ссылки

Что такое нефелометрия??

Дисперсия излучения частицами в растворе

В тот момент, когда луч света попадает на частицы вещества во взвешенном состоянии, направление распространения луча меняет свое направление. Этот эффект зависит от следующих аспектов:

1. Размеры частицы (размер и форма).

2. Характеристика суспензии (концентрация).

3. Длина волны и интенсивность света.

4. Расстояние падающего света.

5. Угол обнаружения.

6. Показатель преломления среды.

нефелометр

Нефелометр - это инструмент, используемый для измерения частиц, взвешенных в жидком образце или в газе. Таким образом, фотоэлемент, расположенный под углом 90 ° относительно источника света, обнаруживает излучение частиц, присутствующих в суспензии.

Кроме того, свет, отраженный частицами в направлении фотоэлемента, зависит от плотности частиц. На диаграмме 1 представлены основные компоненты нефелометра:

. Источник излучения

В нефелометрии жизненно важно иметь источник излучения с высокой светоотдачей. Существуют различные типы, начиная от ксеноновых и ртутных ламп, вольфрамовых галогенных ламп, лазерного излучения и др..

В. Монохроматорная система

Эта система расположена между источником излучения и кюветой, благодаря чему исключается попадание на кювету излучения с различными длинами волн по сравнению с желаемым излучением..

В противном случае реакции флуоресценции или нагревательные эффекты в растворе могут вызвать отклонения от измерения..

С. Чтение кюветы

Это обычно призматический или цилиндрический контейнер, и может иметь разные размеры. В этом одно решение в исследовании.

D. детектор

Детектор расположен на определенном расстоянии (обычно очень близко к резервуару) и отвечает за обнаружение излучения, рассеянного частицами суспензии..

Е. Система чтения

Обычно это электронная машина, которая получает, преобразует и обрабатывает данные, которые в данном случае являются измерениями, полученными в результате проведенного исследования..

отклонения

Каждое измерение подвержено проценту ошибок, который в основном определяется:

Загрязненные ведра: в кюветах любой агент, внешний по отношению к исследуемому раствору, который находится внутри или снаружи кюветы, уменьшает излучаемый свет на пути к детектору (дефектные кюветы, пыль, прилипшая к стенкам кюветы).

помехи: Присутствие какого-либо микробного загрязнения или мутности рассеивает лучистую энергию, увеличивая интенсивность рассеивания.

Флуоресцентные соединения: это соединения, которые при возбуждении падающим излучением вызывают ошибочные и высокие показания плотности дисперсии.

Консервация реагентов: Неадекватная температура системы может вызвать неблагоприятные условия для исследования и спровоцировать присутствие мутных реагентов или осадков.

Колебания в электроэнергии: Во избежание того, что падающее излучение является источником ошибки, стабилизаторы напряжения рекомендуются для равномерного излучения..

Метрологические характеристики

Поскольку излучаемая мощность детектируемого излучения прямо пропорциональна массовой концентрации частиц, нефелометрические исследования в теории имеют более высокую метрологическую чувствительность, чем другие аналогичные методы (такие как турбидиметрия)..

Кроме того, этот метод требует разбавленных растворов. Это позволяет минимизировать явления как поглощения, так и отражения.

приложений

Нефелометрические исследования занимают очень важное место в клинических лабораториях. Область применения варьируется от определения иммуноглобулинов и белков острой фазы, комплемента и коагуляции..

Обнаружение иммунных комплексов

Когда биологический образец содержит интересующий антиген, его смешивают (в буферном растворе) с антителом с образованием иммунного комплекса.

Нефелометрия измеряет количество света, рассеянного реакцией антиген-антитело (Ag-Ac), и, таким образом, обнаруживаются иммунные комплексы..

Это исследование может быть проведено двумя методами:

Нефелометрия конечной точки:

Эта методика может быть использована для анализа конечной точки, в которой антитело исследуемого биологического образца инкубируется в течение двадцати четырех часов..

Ag-Ac комплекс измеряется с помощью нефелометра, и количество рассеянного света сравнивается с тем же измерением, проведенным до образования комплекса.

Кинетическая нефелометрия

В этом методе скорость комплексообразования контролируется непрерывно. Скорость реакции зависит от концентрации антигена в образце. Здесь измерения выполняются как функция времени, поэтому первое измерение выполняется в момент времени «ноль» (t = 0)..

Кинетическая нефелометрия является наиболее часто используемым методом, поскольку исследование может быть проведено за 1 час по сравнению с длительным периодом времени метода конечной точки. Коэффициент дисперсии измеряется сразу после добавления реагента.

Поэтому, пока реагент постоянен, количество присутствующего антигена считается прямо пропорциональным скорости изменения.

Другие приложения

Нефелометрия обычно используется в химическом анализе качества воды, для определения чистоты и контроля процессов ее обработки..

Он также используется для измерения загрязнения воздуха, при котором концентрация частиц определяется по дисперсии, которую они производят в падающем свете..

ссылки

  1. Britannica, E. (s.f.). Нефелометрия и турбидиметрия. Восстановлено с britannica.com
  2. Аль-Салех, М. (с.ф.). Турбидиметрия и нефелометрия. Получено с pdfs.semanticscholar.org
  3. Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Восстановлено с technochemical.com
  4. Morais, I.V. (2006). Турбидиметрический и нефелометрический анализ потока. Получено с repositorio.ucp.p
  5. Сассон, С. (2014). Принципы нефелометрии и турбидиметрии. Получено с сайта notesonimmunology.files.wordpress.com
  6. Стэнли Дж. (2002). Основы иммунологии и серологии. Олбани, Нью-Йорк: Томпсон Лирнинг. Получено из books.google.co.ve
  7. Wikipedia. (Н.Д.). Нефелометрия (медицина). Получено с en.wikipedia.org